1. 血液中视黄醇浓度测试(临床常用)
用于评估人体维生素A水平,通常通过高效液相色谱法(HPLC)进行。
步骤:
-
样本采集:
- 采集空腹静脉血(避免溶血),置于避光试管中(视黄醇对光敏感)。
- 离心分离血清或血浆,避光保存(-20℃以下长期储存)。
-
样本处理:
- 加入乙醇沉淀蛋白质。
- 用有机溶剂(如正己烷)萃取视黄醇。
- 离心后取上层有机相,氮气吹干浓缩。
-
HPLC分析:
- 使用反相C18色谱柱,流动相为甲醇/水(比例如90:10)。
- 紫外检测器(波长325nm)定量视黄醇峰面积。
- 通过标准曲线计算浓度(单位:μg/dL或μmol/L)。
-
参考范围:
- 正常血清视黄醇浓度:30–70 μg/dL(成人)。
- <20 μg/dL提示缺乏,>100 μg/dL可能过量。
2. 护肤品中视黄醇浓度测试
用于质量控制,常用HPLC或紫外分光光度法。
步骤:
-
样本制备:
- 精确称取护肤品样品,用甲醇或乙醇溶解并超声提取。
- 过滤后避光保存待测。
-
HPLC分析:
- 类似血液检测方法,对比标准品保留时间和峰面积定量。
-
替代方法(快速筛查):
- 紫外分光光度法:测定325nm吸光度,通过标准曲线计算浓度。
3. 食品或饲料中视黄醇测试
需先皂化释放视黄醇,再用HPLC分析。
步骤:
-
皂化处理:
- 样品与氢氧化钾-乙醇溶液加热皂化,水解脂肪。
- 用乙醚萃取未皂化的视黄醇。
-
纯化与检测:
- 萃取液洗涤后浓缩,HPLC分析(方法同前)。
注意事项:
- 避光操作:视黄醇易光解,全程需避光(如使用棕色玻璃器皿)。
- 标准品校准:每次测试需同步运行视黄醇标准品。
- 方法验证:不同样本可能需调整提取溶剂或色谱条件。
- 安全防护:有机溶剂操作需在通风橱中进行。
简易测试(非专业)
家用护肤品无法精确自测浓度,但可通过以下方式初步判断:
- 产品标签:查看成分表及浓度标注(如0.1%、0.5%等)。
- 实验室送检:联系第三方检测机构(如SGS、华测等)进行HPLC分析。
如需专业检测结果,建议委托具备资质的实验室完成。